Caryotype constitutionnel postnatal

Introduction Le caryotype est l'observation et la classification de l'ensemble des chromosomes d'une cellule en métaphase ou en prométaphase. C'est une observation globale du génome sans analyser le contenu (les gènes). La résolution du caryotype métaphasique est d'environ 5 Mb. Techniques conventionnelles du caryotype Principaux tissus étudiés TypeTissus Caryotype postnatalLymphocytes T +++, fibroblastes Caryotype prénatalVillosités choriales, liquide amniotique, sang du cordon fœtal Caryotype hématologiqueMoelle osseuse, blastes Caryotype tumoralTissu tumoral, ganglions, épanchement liquidien Obtention des métaphases analysables Culture cellulaire (lymphocytes T +++) : sang recueilli stérilement sur héparine, incubé 48-72h dans un milieu de culture contenant une lectine mitogène (phytohémagglutinine PHA) Blocage en métaphase par la colchicine : bloque l'appareil fusorial par blocage de la polymérisation de la tubuline Choc hypotonique : dispersion des chromosomes (éclatement de la membrane nucléaire) Fixation des préparations chromosomiques (mélange méthanol/acide acétique) Étalement sur lames Pour le caryotype, le sang est recueilli sur héparine (pas EDTA qui est pour la biologie moléculaire). La colchicine bloque les cellules en métaphase en inhibant la polymérisation de la tubuline. La PHA stimule la division des lymphocytes T. Classement des chromosomes Les chromosomes métaphasiques humains sont classés selon 3 critères : Taille (du plus grand au plus petit) Position du centromère (indice centromérique) : métacentrique, submétacentrique, acrocentrique Bandes chromosomiques (techniques de banding : bandes G, R, C, Q) Chromosomes humains : 22 paires d'autosomes (1 à 22) + 1 paire de gonosomes (XX ou XY) = 46 chromosomes au total. Nomenclature (ISCN) La formule chromosomique suit la nomenclature ISCN (International…